BioAssay Systems 開(kāi)發(fā)和銷售創(chuàng)新的高通量分析解決方案，以滿足生命科學(xué)行業(yè)不斷增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems 的創(chuàng)始人在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)方面擁有超過(guò) 50 年的豐富經(jīng)驗(yàn)。在過(guò)去的 18 年中，我們?yōu)樗幬锇l(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究開(kāi)發(fā)了 200 多種檢測(cè)試劑盒。

上海起發(fā)bioassaysys SLLU-200說(shuō)明書(shū)

SuperLight™ Luciferase Reporter Gene Assay Kit

SuperLight™ 螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒

貨號(hào)： SLLU-200

應(yīng)用

• 用于快速定量轉(zhuǎn)染細(xì)胞中熒光素酶報(bào)告基因表達(dá)和高通量藥物篩選的明亮生物發(fā)光試劑系統(tǒng)。

主要特點(diǎn)

• 高靈敏度和寬檢測(cè)范圍：檢測(cè)低至 2 fg 熒光素酶和低至 4 個(gè)細(xì)胞。此外，發(fā)射的光在七個(gè)數(shù)量級(jí)上呈線性。

• 與常規(guī)實(shí)驗(yàn)室和 HTS 格式兼容：可以在 LJL Analyst、Berthold Luminometer、Top-Count、MicroBeta 計(jì)數(shù)器、化學(xué)發(fā)光圖像讀板器 (CLIPR/LeadSeeker) 上在試管或微孔板中進(jìn)行分析。與所有液體處理系統(tǒng)兼容的檢測(cè)試劑。

• 快速方便：均質(zhì)“混合和測(cè)量"測(cè)定法可在 10 分鐘內(nèi)檢測(cè)熒光素酶水平。最佳組合的試劑系統(tǒng)允許一個(gè)單一的添加步驟，以及同時(shí)的細(xì)胞裂解和檢測(cè)。

• 堅(jiān)固且適用于 HTS：在 96 孔和 384 孔板中觀察到 Z 因子為 0.6 至 0.8。可以在 HTS 液體處理系統(tǒng)上輕松實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。

方法

• 發(fā)光

樣品

• 細(xì)胞等

物種

• 全部

尺寸

• 200 次測(cè)試

檢測(cè)限

• 2 fg 螢光素酶

保質(zhì)期

• 12個(gè)月

更多細(xì)節(jié)

• SuperLight™ 螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)基于對(duì)哺乳動(dòng)物、酵母或大腸桿菌細(xì)胞中螢光素酶表達(dá)的定量，使用螢光素和 ATP 作為底物。該反應(yīng)產(chǎn)生光，可以方便地在光度計(jì)上測(cè)量。這種生物發(fā)光報(bào)告基因檢測(cè)非常靈敏，特別適用于量化重組細(xì)胞中的熒光素酶表達(dá)。這種超靈敏、均質(zhì)的基于細(xì)胞的測(cè)定只需向細(xì)胞中添加一種試劑，并在短暫的孵育步驟（2 分鐘）后測(cè)量光強(qiáng)度。測(cè)定可以在試管、比色皿或多孔板中進(jìn)行。所有試劑盒組件都與培養(yǎng)基和所有液體處理系統(tǒng)兼容。具有延長(zhǎng)的發(fā)光發(fā)射動(dòng)力學(xué)（半衰期 40 分鐘），SuperLight™ 螢光素酶檢測(cè)特別適用于 96 孔、384 孔和 1536 孔板中的高通量篩選。此外，試劑盒中提供的試劑經(jīng)過(guò)精心配制，具有最高的靈敏度、重現(xiàn)性和長(zhǎng)保質(zhì)期。該試劑盒的應(yīng)用包括基因調(diào)控研究和基因調(diào)節(jié)劑的高通量篩選。

我們可以確定大腸桿菌細(xì)胞中的 ATP 濃度嗎？

是的。Ishida A (2002, Anal. Biochem 305, 236-241) 描述了使用等體積的 10% TCA 和大腸桿菌細(xì)胞培養(yǎng)物。在室溫下靜置 3 分鐘。將 1 vol 的細(xì)胞提取物與 19 vol 的 25 mM Hepes、17 mM NaOH 混合，并在測(cè)定前將 pH 調(diào)節(jié)至 7.8。

在 24 孔格式下工作時(shí)，如何調(diào)整您的方案以適應(yīng)貼壁細(xì)胞？

裂解 24 孔板中的細(xì)胞，然后將 50 µL 細(xì)胞裂解液加入 50 µL SuperLight 試劑（10 µL + 10 µL 也可以）。或者，可以用胰蛋白酉每/EDTA 收集細(xì)胞，將細(xì)胞重新懸浮在相同體積（200-500 μL 培養(yǎng)基）中。進(jìn)行 50 μL + 50 μL 測(cè)定。