纖溶酶原（無論是Glu-1，Lys-77還是Val-442）通過水解Arg560-Val561肽鍵而轉化為活性絲氨酸蛋白酶纖溶酶，產生NH2端重鏈（A）和COOH端輕鏈（B ）通過2個二硫鍵（1-3）連接的鏈。這種轉化由多種生理和病理激活劑催化，包括尿型纖溶酶原激活劑，組織型纖溶酶原激活劑，鏈激酶，葡激酶，激肽釋放酶，因子IXa和XIIa。COOH末端衍生的輕鏈（Mr = 26,000）包含催化三聯體（His42，Asp85和Ser180）以及鏈激酶的結合位點。NH 2末端衍生的重鏈的分子量范圍為63,000至12,000，具體取決于其起源的纖溶酶原的類型。在沒有抑制劑的情況下，纖溶酶從纖溶酶（纖溶酶原）切割氨基端的Glu1至Lys76肽，產生Lys-纖溶酶，與Glu形式相比，纖溶酶對血纖蛋白的親和力更大。Lys-纖溶酶原的重鏈包含5個內部序列同源性稱為三環的三環二硫鍵橋接區域。指環1-4含有ω-氨基羧酸和血纖蛋白結合位點。

纖溶酶是具有廣泛特異性的絲氨酸蛋白酶，其除了切割血纖蛋白外，還能夠活化和/或降解凝血，激肽產生和補體系統的化合物。盡管纖溶酶可以在體外被多種血漿蛋白酶抑制劑抑制，但據信體內對纖溶酶的調節主要是通過與α2-抗纖溶酶相互作用，而在較小程度上與α2-巨球蛋白相互作用。

如Robbins等人所述，人尿Ly-纖溶酶使用尿激酶由均質的Glu-纖溶酶原制備。（3）。血漿纖維蛋白含量為50％（體積/體積）的甘油/水，應儲存在-20°C下。通過生色底物測定法測量活性，并通過SDS凝膠電泳判斷純度。